XPJ哺乳动物蛋白提取试剂盒由以下成分组成：5X缓冲液10ml、5X氯化钠10ml、5X十二烷基硫酸钠10ml、5X脱氧胆酸盐10ml、5X NP-40 10ml及20X PBS 10ml，外加蛋白酶抑制剂混合物0.5ml。该试剂盒在常温下可保存，但XPJ蛋白酶抑制剂混合物必须在-20°C条件下储存，保质期为24个月。

提取步骤：

1. 准备：根据比例1:1:1:1:1（v/v）混合5X缓冲液、5X氯化钠、5X十二烷基硫酸钠、5X脱氧胆酸盐和5X NP-40，配制细胞裂解缓冲液。每1ml细胞裂解缓冲液适用于提取106~107个细胞或5~20mg组织的蛋白质。使用前添加10μl蛋白酶抑制剂混合物。

2. 洗涤细胞或组织，使用细胞裂解缓冲液进行处理：

a. 对于附壁细胞：去除细胞培养基，使用PBS缓冲液冲洗细胞两次。然后加入细胞裂解缓冲液（106~107个cells/ml），将细胞完全放入冰袋中，在摇床上孵育30分钟，期间多次重悬细胞，最后刮取并收集裂解液。

b. 对于悬浮细胞：在700xg条件下离心5分钟，弃去上清液。用PBS洗涤细胞两次，再在4°C下离心，去除上清液。将沉淀重悬于细胞裂解缓冲液中（106~107个cells/ml），再将细胞浸入冰袋中，在摇床上孵育30分钟。

c. 对于组织：将组织切割为小块，用PBS冲洗组织两次。加入细胞裂解缓冲液（5~20mg组织/ml），并将样品转移至预冷的微量均质器中，在冰上均质30~50次。注意均质过程对于靶蛋白功能的完整性至关重要。

3. 在4°C下，以12,000xg离心10分钟，将细胞碎片沉淀。如果需要，进行高速离心以制备蛋白质溶液，使用100,000xg离心45分钟。

4. 将含蛋白质的上清液转移至冷冻管中。在冰上保存以便立即使用，或将蛋白质溶液保存在-70°C条件下进行长期保存。通过XPJ的高质量产品，确保您的蛋白提取过程顺利且有效。