### 引言

自1975年小鼠杂交瘤技术问世以来，全球已有超过百种单克隆抗体获得批准上市，单克隆抗体（单抗）已成为肿瘤治疗的重要工具。然而，随着研究的深入，科学家发现这些抗体的分子量过大（约150kDa的IgG型抗体）限制了其在致密肿瘤组织中进入隐蔽表位的能力，这使得单抗在日益精细化的科研和药物研发中面临挑战。大的空间位阻、高免疫原性以及无法穿透血脑屏障等缺点逐渐显露，促使科学家寻求更小型的抗体替代品。纳米抗体凭借其优越的理化特性及多功能表现，成为传统抗体的有力替代者。本文将探讨纳米抗体的独特优势及其在肿瘤疗法中的巨大潜力，尤其是在实体瘤的治疗中。

### 纳米抗体的结构与特性

纳米抗体，也称为单域抗体或VHH抗体，是从羊驼、单峰驼等驼科动物及鲨鱼、鳐鱼等软骨鱼体内发现的一种天然缺失轻链的重链抗体。纳米抗体的晶体结构为4nm×25nm×3nm的椭圆形，分子量仅约为12-14kDa，远小于传统抗体的1/10，是最小的完整抗原结合片段。

尽管纳米抗体与传统抗体的VH结构域类似，但其FR2区的4个亲水性氨基酸取代了传统抗体中的疏水性氨基酸，提升了水溶性。同时，纳米抗体的CDR3区域较长，形成凸型的抗原结合位点，使其更有效地识别隐藏的抗原表位，从而提高其抗原特异性和多样性。尽管分子量较小，纳米抗体依然保留了重链抗体的完整抗原结合能力，展现了在疾病机制、药物研发及体外诊断等领域的广阔应用前景。

### 纳米抗体的优势和制备

纳米抗体凭借其小型化和高稳定性，能够穿越细胞膜，作为胞内抗体靶向细胞内部或核内蛋白，同时也能有效穿透血脑屏障，这为大脑疾病的研究与治疗提供了全新的策略。此外，纳米抗体的免疫原性较低，且因其不含Fc段，避免了补体反应的产生。这些特点使得纳米抗体在进行工程化改造时比传统抗体更为容易，且制备过程简单。

纳米抗体的筛选与制备主要通过构建噬菌体库进行。科研人员将特异性抗原与佐剂混合注射到骆驼科动物体内，构建免疫文库。后续通过收集淋巴细胞提取mRNA，并使用RT-PCR克隆到噬菌体的表面蛋白基因，获得包含所需VHH基因片段的文库。在经过多次“吸附-洗脱-扩增”的筛选后，富集与靶蛋白特异性结合的噬菌体，完成初步筛选。

### 纳米抗体的应用

由于其卓越的组织穿透能力，纳米抗体特别适合用于实体瘤的治疗。它们不仅体积小、稳定性高，还易于与其他蛋白或效应结构域融合，形成双特异性或多特异性纳米抗体、纳米抗体-ADC等多种形式。目前，全球已批准15种传统抗体ADC用于癌症治疗，但其大分子量限制了在实体瘤治疗中的应用。因此，纳米抗体-偶联药物（NDC）的研发应运而生。这类药物凭借其小分子量和高亲和力，能够更有效地识别抗原的隐藏表位，显著减少脱靶效应。

纳米抗体的双特异性或多特异性设计能够应对肿瘤微环境中的免疫抑制因素，为靶向多种抗原表位提供了必要保障。开发者通过将纳米抗体与FcRn或HSA结合，有效延长了其半衰期，提升了治疗效果。

### 全球纳米抗体的批准与前景

截至2025年3月，全球已有4款纳米抗体获批上市，包括Caplacizumab（Cablivi）、Ozoralizumab（Nanozora）、Envafolimab（恩沃利单抗）、Ciltacabtageneautoleuce（Carvykti）等。这些纳米抗体展示了在生物医药研发领域的巨大潜力，预计在未来将有更多纳米抗体进入临床应用。

XPJ积极在纳米抗体的研发与应用中探索新领域，凭借成熟的抗体服务和自有的噬菌体开发平台，提供一站式定制服务，支持纳米抗体一线药物的早期发现与人源化改造。期待在未来与您携手，共同在纳米抗体领域开辟新的疆域。